还在为纤维素降解菌分离难、纯化不纯、功能验证不规范、原位定位无手段而困扰?
微基生物依托多年微生物培养平台,紧扣高分文献实验体系,打造纤维素降解微生物菌株分离、纯化、鉴定、功能验证、条件优化、原位定位一站式技术服务,助力科研团队快速获得高活性菌株,支撑农业废弃物资源化、堆肥增效、生物基产品开发等项目落地。
一、纤维素降解菌分离培养核心实验与结果呈现
1.菌株定向分离与初筛
样本富集(堆肥、土壤、农业废弃物)→选择性培养基培养→透明圈初筛(CMC-Na+刚果红染色)→多次划线纯化→-80℃低温保藏交付
图1纤维素降解菌刚果红染色透明圈初筛结果
2. 菌株分子与生化鉴定
形态/生化鉴定、16S rRNA测序+构建系统发育树、生长曲线测定,完成菌株精准分类与生长特性解析。
图2纤维素降解菌菌株形态及其革兰氏染色图
图3纤维素降解菌菌株生长曲线
3. 功能验证与酶活/降解率定量测定
采用DNS法测定纤维素酶活、滤纸条崩解试验(液体定性验证)、秸秆/蔗渣降解率测定、产酶条件优化与稳定性测试,全面评价菌株降解能力。

图4滤纸降解试验结果
图5秸秆降解外观变化图

图6不同菌株秸秆降解率柱状图
4.高分文章必备:菌株定量与原位可视化
菌种特异性qPCR探针检测试剂盒:基于菌株全基因组序列设计种/株水平高特异性TaqMan探针,实现功能菌株在土壤/堆肥中的准确定量与动态追踪。
FISH荧光原位杂交检测试剂盒:定制荧光原位杂交探针,对目标功能菌原位可视化定位。
1)植物根系纵向切片展示
2)植根系纵向切片展示
蓝色荧光(DAPI染色):呈现根系样本中所有细菌的整体分布;红色荧光(FISH探针标记):定位目标功能微生物。图像叠加可直接观察目标菌在总群落中的位置与占比,快速判断目标菌的存活状态与富集情况。
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参考文献
1.Padhan K, Patra RK, Sethi D, et al. Exploitation of cellulose degrading bacteria in bioconversion of agro-wastes[J]. Chemosphere, 2024, 347:140654.
2.王光琴,黄莺,温明霞,等. 5株纤维菌属菌株的分离、鉴定及产酶活性研究 [J]. 中国农学通报,2021, 37 (15): 112-119.
3.程鹏,刘姗姗,王玉,等. 1株高产纤维素酶菌株的筛选鉴定及对稻秆降解的研究 [J]. 华南农业大学学报,2019, 40 (1): 84-91.
4.金海洋,等。秸秆降解菌剂对水稻秸秆还田土壤肥力及产量的影响[J]. 中国土壤与肥料,2020 (3): 168-174.

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