活性淤泥、菌体/菌液微生物采用传统培养方法难以全面、准确地反映微生物群落结构与功能状态。微基生物依托前沿的荧光原位杂交(FISH)技术,针对性推出活性淤泥、菌体/菌液微生物FISH检测+涂片制备服务。该服务无需复杂的培养流程,即可实现微生物原位定位与定性分析,最大程度保留样本中微生物的原始状态。
客户仅需要提供活性淤泥混合液、菌体/菌液样本,后续的涂片制备、FISH 检测、结果分析等全流程专业操作,均由微基生物团队完成,为客户节省时间与技术成本的同时,确保检测结果的准确性与可靠性。

FISH技术检测原理
FISH(荧光原位杂交)技术基于核酸分子杂交原理,通过针对样本中目标微生物(如硝化菌、反硝化菌等功能微生物)的16SrRNA基因序列设计出与目标微生物特异性核酸序列互补的荧光标记探针,利用带有荧光标记的特异性寡核苷酸探针,让探针与样本中目标微生物的核酸在适宜条件下发生特异性结合。通过荧光显微镜,可直接在细胞原位观察到荧光信号,从而精准定位目标微生物,同时实现微生物的定性识别与定量分析,清晰反映样本中微生物群落结构与功能状态。
微基生物自主研发荧光原位杂交检测试剂盒,可根据客户具体检测需求(如特定功能菌分析、复杂群落解析)定制具体方案,确保检测结果的针对性与可靠性。
样本采集
² 活性淤泥混合液:50-100mL,需充分混合均匀后采集,确保样本具有代表性。采集取混合均匀的淤泥层,严格避免采集表层浮渣(含大量死菌及杂质)或底部沉泥(群落结构单一),确保样本反映真实微生物状态。
² 细菌样本(菌体/菌液):浓缩菌液/菌体,一定体积的菌液,或菌体悬浊液,离心后菌体沉淀肉眼可见沉淀(建议菌湿重5mg以上),PBS洗涤后,采用终浓度15%-25%甘油重悬,-80℃冻存。
注:使用无菌采样工具(如无菌离心管、采样勺),避免外界微生物污染;采集后立即密封离心管,避免样本暴露于空气超过30min,防止微生物活性受影响。
样本保存
短期保存:将样本置于2-8℃冰箱中保存,保存时间≤48h,保存期间需每隔12h轻轻摇匀1次,防止微生物沉降;
长期保存:向样本中加入终浓度20%的甘油,-80℃冷冻保存,保存时间≤3个月,检测前需室温缓慢解冻,避免反复冻融。
检测结果可视化
微生物整体分布与目标菌定位

蓝色荧光(DAPI染色):呈现活性淤泥中所有微生物的整体分布;红色荧光(FISH探针标记):定位目标功能微生物。图像叠加可直接观察目标菌在总群落中的位置与占比,快速判断目标菌的存活状态与富集情况。
微基生物聚焦微生物检测领域,致力于为客户提供微生物 FISH 检测全流程一站式服务。针对动物组织、肿瘤、根系、菌液、菌体、活性淤泥等多类型样本,我们还可提供专业的制备服务,助力样本处理更高效、检测结果更精准。如有检测需求,可通过官网咨询或拨打服务热线021-50763698,获取专属技术支持。
参考:Nielsen, J. L., Seviour, R. J., & Nielsen, P. H. (2016). 7 Microscopy. In M. C. M. van Loosdrecht, P. H. Nielsen, C. M. Lopez-Vazquez, & D. Brdjanovic (Eds.), Experimental Methods in Wastewater Treatment (pp. 264-284). IWA Publishing.

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