微生物FISH与IF共检测

微生物与宿主如何相互作用？传统技术存在明显局限：分离培养、16S rRNA测序等虽能明确微生物种类与丰度，却无法定位其在宿主组织或细胞内的具体定植位置。

微基生物IF-FISH共检测服务，创新融合FISH与IF优势：以微生物特异性核酸探针（如16S rRNA探针）实现对微生物的精准定位与定性，明确其定植区域及聚集状态，同时借特异性抗体标记，量化宿主目标蛋白表达并解析细胞功能，实现微生物定位、活性及宿主互作的多维解析。

 

服务流程

 

 

实验关键注意事项

1.探针-抗体兼容性优化：针对不同抗体的孵育温度、时间、浓度参数，定制专属杂交方案，避免交叉干扰，确保双重信号高效捕获。客户需提供抗体。

2.严格质控体系：设置阳性对照（已知阳性样本）、阴性对照（无探针孵育组）、探针特异性对照及抗体阴性对照，严格优化杂交温度、洗脱强度等条件，确保特异性信号检测。

3.多通道检测支持：支持4色荧光通道同步检测（含DAPI染核通道），可同时标记3种目标微生物，满足复杂实验设计需求。

4.样本质量要求：石蜡切片需经梯度脱蜡确保探针穿透性，冰冻切片快速固定防止组织自溶，菌液/涂片样本优化分散度避免聚集影响观察。

 

样本类型与检测周期   

支持样本：冰冻切片、石蜡切片、菌液/菌体涂片、活性淤泥样本等

检测周期：实验材料（样本、抗体、探针等）备齐后2-4周，具体以合同约定为准

 

文献分享 

肿瘤内微生物促进乳腺癌转移机制研究

（文献来源：Fu A K, Yao B Q, Dong T T, et al. Tumor Resident Intracellular Microbiota Promotes Metastatic Colonization in Breast Cancer〔J〕. Cell, 2022）

1.检测方法：

采用FISH与IF共检测技术，以16S rRNA FISH探针标记细菌，结合角蛋白8+18、LPS、LTA 等特异性抗体，同步实现微生物定位与宿主细胞/蛋白标记，搭配DAPI染核完成多维度观测。

2.关键检测结果与图像解析：

1）肿瘤组织中微生物定位

16S FISH与IF共染色证实，肿瘤内细菌主要定植于肿瘤细胞细胞质内，核周区域呈点状分布，且同时存在革兰氏阳/阴性菌，证实肿瘤组织存在稳定定植的微生物群落。

(A) 16S FISH分析（红色）显示细菌在核周区域呈点状分布；(B) LPS IHC染色（革兰氏阴性菌，红色）；(C)LTA染色（革兰氏阳性菌，红色），蓝色为DAPI染核。

2）肺转移灶中微生物分布

肺转移灶区域富集大量细菌信号，正常肺组织中细菌信号极少，证明肿瘤细胞转移时会携带微生物定植于远端器官。

 

  

 

(F)16S FISH分析带有PyMT肿瘤转移的肺组织切片。

(G) 血液中角蛋白8+18抗体和16S探针染色和定量循环肿瘤细胞中的细菌。

注：红色-16S FISH 探针，蓝色-DAPI，绿色-肿瘤细胞标志物。

 

微基生物凭借专业的技术团队、标准化的实验流程、先进的检测设备及丰富的项目经验，为您提供优质的微生物FISH与IF共检测服务。我们将全程为您提供技术支持，从实验设计到结果解读一站式解决，助力您在科研道路上快速突破、成果斐然！